编读往来

发布时间:2018-08-01       作者:DDM       来源:临床实验室        浏览:613       收藏: 0

永丰县中医院检验科 —— 匿名读者

肺炎支原体PCR检测在实验室诊断过程中的意义?有什么优势和劣势?


解放军总医院临床检验科张倩博士:肺炎支原体感染全球均可发生,可引起散发呼吸道感染或小流行一年四季均可发病,常在人群聚居较多的场所传播,易引发集体感染,或造成家庭成员间交叉传染,难以根治。近年来,肺炎支原体感染在年幼儿童中感染率有所增加,临床表现不典型;呈常年流行趋势;时有群体流行病例发生;重症患者增多。肺炎支原体已逐渐成为小儿呼吸系统的主要病原体。


肺炎支原体感染常无特异性,可累及多个脏器,引起严重的肺外并发症。当肺外并发症为首发症状时,易造成误诊。因此早期诊断对于肺炎的诊断、治疗及避免抗生素滥用都具有重要意义。国内目前应用于肺炎支原体感染诊断常见的方法为:肺炎支原体培养、抗原检测法、血清学检测法和核酸检测法。肺炎支原体分离培养和鉴定是支原体检测公认标准,但实际临床标本中病原体含量少,肺炎支原体对培养条件要求苛刻,操作繁琐,阳性率低,生长缓慢,一般为7~10天,所以这种方法可用于科学研究,对诊断、治疗的帮助意义不大。单克隆抗体检测,特异性、敏感性高,可用于早期诊断,但操作步骤繁多,假阳性严重也限制了推广;肺炎支原体特异性IgM抗体检测在临床上较实用,由于敏感性、特异性比较强,操作方便等优点,目前在临床诊断被广泛采用,但对于免疫系统发育未成熟以及存在免疫缺陷的患儿存在一定局限性。


PCR检测技术的发展为肺炎支原体感染早期诊断提供了条件基础。PCR 检测方法是基于P1基因、16S rRNA基因、ATP酶操纵子基因和延伸因子基因等靶序列扩增的分子生物学检测技术。由于其具有快速、敏感、不存在交叉反应、并且克服了血清学检测受病程和免疫缺陷影响的特点而受到越来越多的关注。有研究表明,PCR检测的特异性和灵敏性与血清学方法相当。但普通PCR操作过程中易污染,假阳性率较高,限制了PCR检测技术的进一步推广应用。然而随着方法技术的不断改进,实时荧光定量PCR的应用,检测的灵敏度及特异度也在不断提高,目前普遍的观点认为PCR方法对于免疫损坏及年幼患儿肺炎支原体感染早期诊断更加适合。PCR检测对于肺炎早期诊断、鉴别诊断及疗效观察均有一定价值,根据患者的临床症状和发病阶段选择适当的标本类型,采用PCR技术进行MP DNA检测,可以更好地为临床提供诊断治疗依据。


酒泉市二院检验科——联系人:陈老师

请问,什么原因引起乳酸检测的结果是零?我们的仪器是雷度ABL90。


解放军总医院临床检验科张倩博士:乳酸是糖无氧氧化(糖酵解)的代谢产物。乳酸产生于骨骼、肌肉、脑和红细胞。经肝脏代谢后由肾分泌排泄。血液中乳酸浓度和这些组织产生乳酸的速率以及肝脏对乳酸的代谢速度有关,约65%的乳酸由肝脏代谢。血乳酸测定可反映组织氧供和代谢状态以及灌注量不足。乳酸水平的增高可见于多种临床疾病。测定乳酸浓度对乳酸酸中毒有重要的诊断意义。


血气分析仪检测乳酸多采用酶电极法,在探头上装有一片三层的乳酸酶膜,其中间固定有乳酸氧化酶。带有酶膜的探头位于充满缓冲液的样品室内,样品注入后,乳酸被膜上的如三氧化酶迅速氧化,生成过氧化氢,后者随后在铂电极上被氧化产生电子,电子流强度与乳酸浓度成正比。


乳酸结果检测为零可能原因:1)样本中混有干扰物质干扰检测。2)操作误差:由于样本中存在血凝块,导致进样量不足,样本量少、进样针插入深度不够、过快的移除样本,导致采样不足等。3)分析包故障或仪器存在系统误差:怀疑一起检测结果有偏差时,可以进行定标(一点和二点定标)、指控(高、中及低值)分析。如果确认某项参数确实存在系统误差,经与参考仪器检测结果进行比较研究后,可通过校正参数使结果得到校正。4)实际值超出检测范围。


由于使用仪器不同,样品情况及其他检测结果情况未知,具体原因需结合实际情况进行分析。


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长治市中医院检验科——联系人:赵老师

请教,生化项目定标后如何进行校准验证?


《临床实验室》建议做高中低值或正常值和病理值的质控品检测。检查结果的精密度和偏移。


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梅县人民医院检验科 —— 匿名读者

干化学的质控是不是可以用湿化学方式做?


《临床实验室》:建议查看说明书并和厂家沟通。有些项目的干化学法不能检测出常规的湿化学的质控品。有基质效应和方法学的问题。


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