赛默飞细胞离心涂片制备整体解决方案

发布时间:2017-11-01       作者:赛默飞世尔       来源:临床实验室        浏览:5079       收藏: 0

经济的、快速的、高质量的单层细胞离心涂片制备系统

近年来,临床病理及检验科为了提高脱落细胞诊断的标准化和准确性,对于常规脱落细胞的单层细胞制备要求日益增高,常规脱落细胞学标本是指在生理或病理情况下自然脱落的细胞,包括宫颈脱落细胞、胸腹水、脑脊液、尿液、痰液等。此外,检验科微生物实验室对微生物的单层涂片制备要求也日益提升,根据CNAS-CL42医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的应用说明,特别强调了对无菌体液的显微镜检查应配备细胞离心涂片机,无菌体液包括血液、脑脊液、胆汁或在病理状态下的密闭体腔分泌液,例如胸腔液、腹腔液等,在无感染时无菌体液通过显微镜检查不会出现细菌。另外,对于需要长期保存的脱落细胞体液样本,需要制备细胞蜡块将细胞永久封存,以便病人复诊及其他需求。


赛默飞Cytospin 4细胞离心涂片机是第4代的细胞离心涂片系统,具有操作简单易行、职业安全性高、样本安全性高、富集细胞、制备质量高等优势,在国内外广泛应用;传统的手工涂片法,在样本制备过程易出现细胞挤压变形、细胞丢失严重导致数量少、有重叠及厚薄不均,不利于诊断。


此外,赛默飞Cytospin 4还可以用于细胞蜡块Cytoblock的制备,细胞蜡块的制备增大了稀有样本及肉眼无法识别的样本检测概率,降低丢失重要样本的概率;增大了稀有样本及肉眼无法识别的样本检测概率,降低丢失重要样本的概率;可稳定的用于免疫组化检测;降低时间成本、替代高价位的琼脂及凝血酶技术。细胞蜡块经过组织处理流程,可将细胞学样本长期保存,便于日后的诊断及多次使用。


赛默飞Cytospin 4细胞离心涂片机从操作者的职业安全性考虑,提供密封的系统,可防止电子和机械组件被意外溢出的样本所损坏;在操作者使用仪器时,样本若不小心洒出或溢出,不会溅到仪器外部,从而保证职业安全性;被样本污染的密封离心转子可放置在高压灭菌锅内进行高压灭菌,操作人员的安全性得到了很大的提升。


赛默飞Cytospin 4在保证职业安全性的前提下,同时保证样本安全性;针对不同的样本,Cytospin 4具有3挡加速度选择,保护易损样本;样本安全警报在试验后每隔1分钟提醒用户,防止制备好的样本长期放置导致干片;对于细胞离心涂片机,平衡是得到良好涂片的基本要求,Cytospin 4可检测仪器没有平稳放置、离心超速时,具有报警提醒功能;盖子未锁紧,报警并阻止仪器运行;在使用双孔、8孔漏斗制备样本时,专用的细胞学载玻片和离心漏斗均有编号,防止出错。


以下是Cytospin 4处理各种体液样本的程序推荐:

1. 脑脊液

1)加入新鲜未固定的脑脊液在适量的离心管中;进行预离心

(600g,离心10min);轻倒出上清液,混匀沉淀物(利用漩涡器)。弃上清液,加10mL Thermo Scientific Cytospin通用细胞保存液(若细胞量很少加5ml),涡旋混匀。

2)使用EZ单孔或双孔漏斗。加入0.2-0.3ml细胞含量较多的细胞

悬液。

3)利用Cytospin涂片机离心:200-800转/分×3~5分钟,低

速。

2. 尿液

1)加入新鲜未固定的尿液在50ml的离心管中,进行预离心

(600g,离心10分钟);弃上清液,加10ml Thermo Scientific Cytospin通用细胞保存液(若细胞量很少加5ml),涡旋混匀。

2)取出EZ Mega漏斗和玻片。先吸取1.0ml Thermo Scientific 

Cytospin通用细胞保存液到EZ Mega漏斗中。然后加入0.2-0.5ml细胞含量较多的细胞悬液;若是细胞含量较少的细胞悬液,最多可加入5.0ml。利用Cytospin涂片机离心:1250转/分×5分钟,高速。

3. 痰液等粘液样本标本制备

1)将痰液滴入50ml离心管内,并至少加入等量的Thermo 

Scientific Mucolexx粘液样本松解液。盖紧离心管,并剧烈振荡(利用漩涡器或手动)30到60秒。

2)进行预离心(600g,离心10分钟)。轻倒出上清液,混匀沉

淀物(利用漩涡器)。使用10ml Thermo Scientific Mucolexx重悬浮沉淀。

3)准备好Thermo Scientific EZ Mega漏斗和玻片。先吸取1.0ml 

Thermo Scientific Mucolexx细胞收集液到EZ Mega漏斗中;然后加入0.2-0.5ml细胞含量较多的细胞悬液;若是细胞含量极少的细胞悬液,最多可加入5.0ml。利用cytospin涂片机离心:1250转/min×5min,高速。

4. 血液,体液,囊内液,支气管冲洗液,膀胱冲洗液及其他液体

1)混匀新鲜未固定的标本,倒入50ml离心管内,最多不超过

25ml。

2)加入至少等量的Thermo Scientific Cytorich去红细胞保存

液,混匀(利用涡旋器或手工荡),观察离心管内标本。利用移液管取出凝块/凝结物类固体团块或厚粘液,以备制作细胞块。

3)室温下静置离心管至少15min(如样本需过夜或周末后再处

理,请冷藏)。

4)离心悬浮液(如600g,以每分钟1500/2000转的速度离心

5min),轻倒出上清液,混匀(利用涡旋器)。

5)观察沉淀物。如沉淀物仍带血样,再添加10ml Thermo 

Scientific Cytorich去红细胞保存液,漩涡,常温下静置10min,再重复步骤4。如无血样,直接进入步骤6。

6)在细胞沉淀物中加入10ml Thermo Scientific Cytospin通用

细胞保存液,混匀(涡旋器)至少10秒。如沉淀物极少,或几乎不见(细胞含量极少的标本),加入Thermo Scientific Cytospin通用细胞保存液的量不要超过5ml。

7)取出EZ Mega漏斗和玻片。先吸取1.0ml Thermo Scientific 

Cytospin通用细胞保存液到EZ Mega漏斗中。然后加入0.2-0.5ml细胞含量较多的细胞悬液;若是细胞含量较少的细胞悬液,最多可加入5.0ml。利用Cytospin涂片机离心:1250转/分×5分钟,高速。

5. 细胞学样本细胞蜡块Cytoblock制备流程

1)在细胞蜡块上标记样本名称

2)在使用细胞蜡块制备系统前,样本需要用固定液固定

3)离心沉淀固定后的细胞样本,弃上清液

4)估计细胞样本的量。如果细胞样本量大概在2滴左右,加入

4滴试剂二,通过涡旋或震荡的方法充分混匀。如果细胞样本量大于2滴,可以选择做2个及以上的细胞蜡块,每个样本需要大概2滴左右,如果细胞样本量足够两个细胞蜡块,可以直接加入8滴试剂二,并用涡旋方法混匀 [预混液可以通过离心漏斗均匀分开(步骤9)]

5)将离心漏斗架平放,插入细胞蜡块盒,将细胞蜡块盒下面的

突起嵌入到离心漏斗架上

6)在孔中加入3滴试剂一,试剂必须完全覆盖住整个孔的范

围,注意不要将试剂一溅到细胞蜡块盒其他部位

7)将细胞蜡块盒的上的滤纸打开,将离心漏斗插入到漏斗夹

中,确保漏斗夹将离心漏斗和细胞蜡块盒夹紧

8)将装载好的离心漏斗放置在离心转子中

9)将细胞悬液加入到离心漏斗中

10)关闭cytospin的盖子,1500rpm,离心5min,加速度为

Low,开始运行仪器

11)等待仪器运行结束,移除转载好的离心漏斗并平置在实验

台上。松开离心漏斗架并移除漏斗,在移除漏斗时,轻轻晃动漏斗将其从细胞蜡块盒上分离。确保制备好的细胞块在细胞蜡块盒中,没有被漏斗粘附,丢弃漏斗

12)在蜡块盒中心再加入1滴试剂一,将蜡块盒盖子合上,并将

其固定

13)用脱水机进行脱水处理

14)打开细胞蜡块盒盖子,将滤纸折下来,用镊子轻轻取出细

胞蜡块底板

15)将细胞块从底板中取出放入包埋磨具中,平整的进行包

埋,丢弃底板和滤纸

16)重新盖上细胞蜡块包埋盒,将其平整面放在包埋磨具上,

用石蜡包埋灌注

17)包埋好的细胞块可以用于石蜡切片,因为厚度比较薄,注

意不要过度粗修


赛默飞细胞离心机Cytospin 4始终作为经济、高效、高质量、安全的单层体液样本细胞制备,帮助客户得到更精确的诊断,让实验室细胞体液样本制备得到标准化的控制,让更多的临床科室操作人员信赖和选择赛默飞,赛默飞致力于帮助客户使世界更健康、更清洁、更安全。


 赛默飞世尔科技(中国)有限公司 供稿


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